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正常結(jié)膜囊?guī)Ь闆r
正常結(jié)膜囊?guī)Ь闆r
【摘要】 目的：調(diào)查不同人群正常結(jié)膜囊?guī)Ь闆r及其對常用抗生素的敏感情況。
方法：對未使用任何滴眼液和抗生素的200名受調(diào)查者，常規(guī)眼科檢查排除淚囊、眼表、前節(jié)疾病后，進(jìn)行結(jié)膜囊細(xì)菌培養(yǎng)和藥物敏感試驗(yàn)。
結(jié)果：在全部受調(diào)查者中，細(xì)菌培養(yǎng)陽性率為43.00%，共培養(yǎng)出15個菌種103個菌株;葡萄球菌最多，共51株(占49.51%)，其中表皮葡萄球菌47株(45.63%)，金黃色葡萄球菌2株(1.94%);類白喉?xiàng)U菌次之，共40株(38.83%)。
>55歲人群結(jié)膜囊?guī)Ь拭黠@高于≤55歲人群，農(nóng)村人群高于城市人群，均差異顯著(P<0.05)。
藥物敏感試驗(yàn)顯示大部分菌株對目前常用抗生素耐藥。
結(jié)論：正常結(jié)膜囊可以帶有細(xì)菌。
內(nèi)眼手術(shù)前應(yīng)選用敏感抗生素以預(yù)防術(shù)后感染的發(fā)生。
【關(guān)鍵詞】 結(jié)膜囊; 細(xì)菌培養(yǎng); 藥物敏感試驗(yàn)
[Abstract] Objective： To investigate the positive rate of bacterial culture of normal conjunctival sac and the sensitivity to commonly used antibiotics among different kinds of people.
Methods: Samples were collected and separated from conjunctival sac of 200 normal eyes of 200 subjects and they accepted no eye drops or antibiotic treatment. Regular eye examinations were performed to exclude the lacrimal sac inflammation, ocular surface diseases and anterior segment eyes diseases.
The samples were cultured and their sensibilities to antibiotics were tested. Results: Bacterial positive rate was 43.00% in 200 eyes.There were 103 strains of bacteria belonging to 15 species.
The most prominent bacterium was staphylococcus(51 strains, 49.51%), in which there were 47 strains of staphylococcus epidermis(45.63%) and 2 strains of staphylococcus aureas(1.94%). The next was corgebacterium(40 strains, 38.83%).
The elder person(more than 55 years old ) showed a significant higher bacterial positive rate(P<0.05). And the people from city had a significant lower bacterial positive rate than those from contryside(P<0.05).
Most of the bacteria were not sensitive to commonly used antibiotic drugs. Conclusion: Bacteria may be exist in normal conjunctival sac. Using susceptible antibiotic drugs before eye surgery is suggested to take precautions against the infection.
[Key words] conjunctival sac; bacterial culture; drug sensitivity test
正常人結(jié)膜囊可分離出正常菌群或條件致病菌，在外傷、手術(shù)等條件下，結(jié)膜囊的細(xì)菌可能導(dǎo)致眼內(nèi)炎的發(fā)生。
感染性眼內(nèi)炎一旦發(fā)生，可以引起眼球的嚴(yán)重破壞和視功能喪失，甚至需要摘除眼球。
因此了解人群中結(jié)膜囊內(nèi)菌種的分布與變化，對眼科內(nèi)眼手術(shù)前合理選擇抗生素以預(yù)防術(shù)后細(xì)菌感染性眼內(nèi)炎的發(fā)生有著重要的指導(dǎo)意義。
本研究對正常人結(jié)膜囊進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)及藥物敏感試驗(yàn)，并對結(jié)果進(jìn)行分析，以期發(fā)現(xiàn)正常人結(jié)膜囊細(xì)菌分布和藥物敏感情況，為臨床用藥提供依據(jù)，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。
1 對象與方法
1.1 對象
隨機(jī)選擇2009年10月至12月間中大醫(yī)院眼科門診、住院的患者或家屬、部分工作人員共200例200只眼，均自愿接受調(diào)查。
其中男性87例，女性113例;右眼94例，左眼106例;年齡9～90(平均56.51)歲，≤55歲者76例，>55歲者124例。
受試者采樣前1個月內(nèi)未使用任何滴眼液和抗生素，常規(guī)眼科裂隙燈檢查排除眼瞼、眼表、眼前節(jié)病變，淚道沖洗排除淚囊炎癥。
1.2 采集方法
取材均由專職眼科醫(yī)生進(jìn)行，取材地點(diǎn)常規(guī)定期行紫外線消毒。
取材時(shí)囑受試者向上方注視，用左手大拇指和食指分開眼瞼，充分暴露下方結(jié)膜囊，右手用無菌棉拭子放入結(jié)膜囊內(nèi)，輕輕扭轉(zhuǎn)擦拭取材，自一側(cè)到另一側(cè);取材時(shí)注意不遺漏內(nèi)眥部，且棉拭子不觸及睫毛或瞼緣等以避免污染。
1.3 細(xì)菌鑒定與藥敏試驗(yàn)
將已采集標(biāo)本的棉拭子涂布劃線于哥倫比亞血瓊脂平板上，然后將標(biāo)本置于37 ℃恒溫CO2細(xì)菌培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，48 h后觀察細(xì)菌生長情況，無細(xì)菌生長者為陰性，有細(xì)菌生長者為陽性。
細(xì)菌菌種鑒定通過美國德林公司MicroScan微生物自動鑒定/藥敏分析系統(tǒng)Walkaway?40或法國生物梅里埃公司VITEK2細(xì)菌自動鑒定分析儀進(jìn)行，同時(shí)檢測各種抗生素的最低抑菌濃度(minimum inhibitory concentration，MIC)。
藥物敏感試驗(yàn)根據(jù)美國國家臨床實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)委員會(national committee for clinical laboratory standards，NCCLS)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行。
1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
采用SPSS 13.0軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，計(jì)數(shù)資料行χ2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
2 結(jié) 果
2.1 結(jié)膜囊細(xì)菌培養(yǎng)情況
送檢200份標(biāo)本中，陽性86例，陰性114例，陽性率為43.00%。
單眼同時(shí)檢出2種細(xì)菌者17例。
共培養(yǎng)出陽性細(xì)菌103株，分屬15個菌屬。
陽性菌株主要是革蘭陽性細(xì)菌，占92.23%，其中表皮葡萄球菌最多，共47株(占45.63%);類白喉?xiàng)U菌次之，共40株(占38.83%)。
革蘭陰性菌少見，占7.77%。
正常結(jié)膜囊檢出細(xì)菌的分布見表1。
表1 正常結(jié)膜囊檢出細(xì)菌菌株的分布情況
2.2 結(jié)膜囊細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果與性別的關(guān)系
200例調(diào)查者中男性87例，其中35例為陽性，陽性率為40.23%;女性113例，其中51例為陽性，陽性率為45.13%。
經(jīng) χ2檢驗(yàn)， χ2=0.482,P=0.487，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
2.3 結(jié)膜囊細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果與年齡的關(guān)系
200例調(diào)查者中≤55歲者76例，其中26例為陽性，陽性率為34.21%;>55歲者為124例，其中60例為陽性，陽性率為48.39%。
經(jīng) χ2檢驗(yàn)， χ2=3.864,P=0.049,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
2.4 結(jié)膜囊細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果與眼別的關(guān)系
200例調(diào)查者中右眼94例，其中38例為陽性，陽性率為40.43%;左眼106例，其中48例為陽性，陽性率為45.28%。
經(jīng) χ2檢驗(yàn)， χ2=0.480,P=0.489，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
2.5 結(jié)膜囊細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果與居住地的關(guān)系
200例調(diào)查者中居住農(nóng)村者為82例，其中58例為陽性，陽性率為70.73%;居住市區(qū)者118例，其中28例為陽性，陽性率為23.73%。
經(jīng)χ2檢驗(yàn)， χ2=43.609,P=0.000,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
2.6 結(jié)膜囊細(xì)菌藥敏試驗(yàn)
大多數(shù)革蘭陽性菌對臨床常用的青霉素、紅霉素、頭孢唑啉及氯潔霉素耐藥，對萬古霉素、利福平、達(dá)福普汀及呋喃妥因等敏感。
革蘭陰性菌檢出率低，對大部分抗生素如氨芐青霉素、頭孢第3代、左氧氟沙星等較為敏感。
3 討 論
細(xì)菌在自然界中廣泛存在，結(jié)膜囊是一個與外界相通的腔隙，長期暴露于自然界中，出生不久就可以有細(xì)菌共生，并隨生活環(huán)境、年齡的變化而不斷變化。
正常人眼瞼、瞼緣處常有表皮葡萄球菌、類白喉?xiàng)U菌、微球菌等寄生。
正常人結(jié)膜囊可無細(xì)菌(約30%)或暫時(shí)存在少數(shù)表皮葡萄球菌、甲型鏈球菌、類白喉?xiàng)U菌、丙酸桿菌，偶見卡他球菌、金黃色葡萄球菌、腸道細(xì)菌等。
長期使用廣譜抗生素、激素等情況下，正常菌群比例關(guān)系發(fā)生改變，或耐藥菌株轉(zhuǎn)為優(yōu)勢，表現(xiàn)為菌群失調(diào)。
眼科診療中耐藥菌株感染、條件致病菌感染，特別是革蘭陰性桿菌感染已日益突出[1]。
文獻(xiàn)報(bào)道正常結(jié)膜囊的細(xì)菌帶菌率為20.6%～98.8%[2-3]不等，最常見的細(xì)菌有表皮葡萄球菌和棒狀桿菌(占25%以上)，痤瘡丙酸桿菌及金黃色葡萄球菌占5%～15%不等[4]。
曾樹森等于2007年報(bào)道397例正常人結(jié)膜囊細(xì)菌培養(yǎng)陽性率為21.2%，前3位為表皮葡萄球菌(51.2%)、金黃色葡萄球菌(11.9%)、棒狀桿菌屬(7.1%)[5]。
孫士營等[6]于2005年對1 733例眼部無感染的白內(nèi)障者術(shù)前進(jìn)行結(jié)膜囊細(xì)菌培養(yǎng)，陽性率為51.6%，主要為革蘭陽性球菌(81.4%)和革蘭陰性桿菌(12.9%)，其中表皮葡萄球菌最多。
本組人群中共培養(yǎng)出陽性細(xì)菌103株，15個菌屬，細(xì)菌培養(yǎng)陽性率為43.00%，位于前3位的分別是表皮葡萄球菌(45.63%)、類白喉?xiàng)U菌(38.83%)和金黃色葡萄球菌(1.94%)，這與大部分文獻(xiàn)報(bào)道相符。
此外我們還檢出了不很常見的草綠色鏈球菌、腐生葡萄球菌、肺炎鏈球菌、糞腸球菌等革蘭陽性球菌，以及大腸埃希菌、陰溝腸桿菌、奇異變形桿菌、洛菲不動桿菌、產(chǎn)堿桿菌屬、耐放線不動桿菌、克氏檸檬酸桿菌等革蘭陰性菌。
本次調(diào)查中，≤55歲者結(jié)膜囊?guī)Ь蕿?4.21%，>55歲者帶菌率為48.39%，后者高于前者，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，這種差異可能與老年人抵抗力下降、淚膜穩(wěn)定性差以及淚液中抗體、補(bǔ)體、乳鐵蛋白等降低有關(guān)。
農(nóng)村人群結(jié)膜囊?guī)Ь蕿?0.73%，明顯高于城市人群(23.73%)(P<0.05)，分析可能與兩組人群的居住環(huán)境、衛(wèi)生習(xí)慣和衛(wèi)生狀況不同有關(guān)。
通常認(rèn)為正常人眼部的這些菌屬為條件致病菌，無致病性或偶有致病性，現(xiàn)在已有條件致病菌成為化膿性眼內(nèi)炎首要致病菌的報(bào)道[7]。
由于眼淚的清洗作用和溶菌酶的溶菌作用，正常結(jié)膜囊內(nèi)的細(xì)菌數(shù)量通常很少，當(dāng)結(jié)膜與角膜上皮完整時(shí)，起到一個屏障作用，一般不會出現(xiàn)感染。
而術(shù)后，由于創(chuàng)傷，某些條件致病菌可引起傷口感染，導(dǎo)致眼內(nèi)炎的發(fā)生，且一旦發(fā)生，可嚴(yán)重?fù)p害患者的視力。
有文獻(xiàn)報(bào)道在細(xì)菌性眼內(nèi)炎、細(xì)菌性角膜潰瘍、瞼緣炎、結(jié)膜炎等眼部感染性疾病中，表皮葡萄球菌占多數(shù)[1，8]，這與我們檢測出正常結(jié)膜囊中表皮葡萄球菌占多數(shù)是一致的，可見條件致病菌與致病菌之間并沒有本質(zhì)上的區(qū)別。
而隨著眼內(nèi)人工晶體植入、閥門管植入、玻璃體切割等手術(shù)的廣泛開展，表皮葡萄球菌的致病性也日益受到重視，現(xiàn)已成為白內(nèi)障人工晶體植入后慢性眼內(nèi)炎、眼外傷、內(nèi)眼手術(shù)后眼內(nèi)感染的常見致病菌[9-10]。
故對于術(shù)前結(jié)膜囊分離出表皮葡萄球菌者應(yīng)予重視，尤其是老年人，由于抵抗力低下，由表皮葡萄球菌引起手術(shù)后感染的可能性較大，而且易產(chǎn)生耐藥菌株，治療上較為棘手。
綠膿桿菌這種在眼部感染中致病力較強(qiáng)的病菌隨著角膜屈光手術(shù)的廣泛開展感染發(fā)生率有所增加[11]，但我們這次調(diào)查中未檢測到該菌，分析可能與綠膿桿菌在正常人眼中存在率極低，而本研究的調(diào)查例數(shù)相對較少有關(guān)。
目前眼部及全身使用的抗生素種類繁多，我們選用臨床常用的抗生素分別對檢出的革蘭陽性和陰性細(xì)菌進(jìn)行藥物敏感試驗(yàn)，結(jié)果表明，培養(yǎng)出的陽性菌大多數(shù)對臨床常用的青霉素、頭孢唑啉、紅霉素、氯潔霉素耐藥，對萬古霉素、呋喃妥因、利福平等敏感，檢出率最多的表皮葡萄球菌對臨床常用的青霉素、紅霉素、氯潔霉素和氧氟沙星產(chǎn)生耐藥菌株。
正常結(jié)膜囊細(xì)菌對臨床常用抗菌藥物耐藥性高，但對不常用抗生素耐藥性低，表明細(xì)菌耐藥性的發(fā)生與臨床用藥密切相關(guān)，大量廣泛使用抗生素將導(dǎo)致結(jié)膜囊內(nèi)正常的細(xì)菌對這些抗生素的耐藥性增加[12]。
所以，在使用抗生素滴眼液時(shí)，要嚴(yán)格掌適應(yīng)證，避免濫用抗生素。
總之，我們關(guān)于正常結(jié)膜囊細(xì)菌帶菌及藥物敏感情況的調(diào)查提示，內(nèi)眼手術(shù)前應(yīng)選用敏感抗生素以預(yù)防術(shù)后感染的發(fā)生。
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