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神經(jīng)外科病房呼吸道感染病原菌分布及藥敏
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神經(jīng)外科病房呼吸道感染病原菌分布及藥敏【1】
摘要：目的 研究分析神經(jīng)外科病房患者呼吸道感染常見的病原菌及其耐藥性，為臨床合理使用抗菌藥物提供依據(jù)。
策略 收集2013年3月～2014年2月，我院神經(jīng)外科住院患者1082份呼吸道標(biāo)本，按相應(yīng)要求分離鑒定病原菌，并進(jìn)行藥敏試驗(yàn)，統(tǒng)計(jì)所分離病原菌的分布及耐藥性。
結(jié)果 我院檢出病原菌639株，陽性率59.1%。
其中革蘭陰性桿菌583株，革蘭陽性球菌36株，真菌20株。
G-桿菌對氨芐西林等抗菌藥物均有較高的耐藥率，但對亞胺培南等敏感性較高。
G+球菌對青霉素類抗菌藥物均耐藥，但對萬古霉素等保持高度敏感率。
白色念珠菌對抗真菌藥物敏感性好。
結(jié)論 神經(jīng)外科病房呼吸道感染病原菌以革蘭陰性桿菌為主，對常用抗菌藥物耐藥性高，定期進(jìn)行藥敏試驗(yàn)和耐藥趨勢分析，對合理選擇抗菌藥物具有重要指導(dǎo)作用。
關(guān)鍵詞：神經(jīng)外科;呼吸道感染;藥敏分析;病原菌
目前市場上抗生素種類多，更新快，抗生素大量使用造成耐藥菌日趨增長，耐藥菌感染是醫(yī)院感染的主要理由[1-2]。
本文總結(jié)了2013年3月～2014年2月，我院神經(jīng)外科住院患者呼吸道標(biāo)本所分離病原菌的分布及耐藥性，對于指導(dǎo)臨床醫(yī)師合理選擇抗菌藥物及減少醫(yī)院感染具有重要作用[3]。
1資料與策略
1.1細(xì)菌來源 收集我院2013年3月～2014年2月神經(jīng)外科住院患者呼吸道標(biāo)本1082份。
質(zhì)控菌株：ATCC25922(大腸埃希菌)、ATCC27853(銅綠假單胞菌)、ATCC29213(金黃色葡萄球菌)，購自衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心。
1.2試劑 藥敏紙片購自北京天壇藥物生物技術(shù)公司，培養(yǎng)基為鄭州安圖綠科生物工程公司產(chǎn)品。
1.3策略 首先對痰標(biāo)本進(jìn)行涂片檢查，符合要求的進(jìn)行培養(yǎng)。
儀器是西門子WALK AWAY96全自動(dòng)細(xì)菌鑒定及藥敏分析儀，并使用該儀器原配的鑒定板，所有過程按照標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程嚴(yán)格進(jìn)行。
2結(jié)果
2.1病原菌分布情況 我院神經(jīng)外科呼吸道標(biāo)本總數(shù)1082份，其中檢出病原菌639株，陽性率59.1%。
以革蘭陰性桿菌為主，占91.2%，其次是革蘭陽性球菌和真菌，見表1。
2.2 病原菌藥敏實(shí)驗(yàn)結(jié)果 革蘭陰性桿菌和革蘭陽性球菌的藥敏試驗(yàn)結(jié)果，見表2、表3。
3討論
神經(jīng)外科呼吸道感染病原菌陽性檢出率較高，以革蘭陰性菌為主，而革蘭陽性菌和真菌所占比例較小，該結(jié)果與報(bào)到文獻(xiàn)類似，只是各病原菌構(gòu)成比稍顯不同[4]。
根據(jù)藥敏試驗(yàn)分析，G-桿菌對臨床常用的氨芐西林、哌拉西林、頭孢唑林、頭孢曲松、四環(huán)素、復(fù)方新諾明等抗菌藥物均有較高的耐藥率，目前對亞胺培南、美羅培南、哌拉西林/他唑巴坦、頭孢哌酮/舒巴坦敏感性較高，但隨著臨床應(yīng)用的增加會出現(xiàn)較多耐藥菌株，因此臨床要特別關(guān)注多重耐藥菌。
G+球菌中金黃色葡萄球(MRSA)的比例也較高，該菌株對所有β-內(nèi)酰胺類藥物均耐藥，不論藥敏結(jié)果如何，臨床使用均無效。
真菌感染呈上升趨勢，提示臨床醫(yī)生對長期大量使用抗生素患者要注意預(yù)防。
加強(qiáng)病原學(xué)及耐藥監(jiān)測，對醫(yī)院感染和臨床用藥具有指導(dǎo)作用。
參考文獻(xiàn)：
[1]凌宙貴，劉衛(wèi)，蔣連強(qiáng)，等.下呼吸道感染病原菌分布及耐藥性分析[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2013，23(014)：3545-3547.
[2]牛瑞超，羅百靈，張立，等.近16年呼吸科病房下呼吸道細(xì)菌感染的病原體變遷，分布及藥敏差異[J].臨床肺科雜志，2013，18(2)：247-250.
[3]李鳳娥，曹銀芳，燕成嶺.下呼吸道感染病原菌的臨床分布與耐藥性研究[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2013，23(3)：689-691.
[4]牛瑞超，羅百靈，張立，等.呼吸科普通病房和呼吸重癥加強(qiáng)治療病房下呼吸道感染病原體的分布及藥敏差異[J].中國呼吸與危重監(jiān)護(hù)雜志，2013，12(2)：124-128.
微波消解—ICP—MS法測定壯藥美巧杯中5種重金屬的含量【2】
【摘要】目的：建立電感耦合等離子質(zhì)譜(ICP-MS)法測定壯藥美巧杯中鉛、鎘、砷、汞、銅5種重金屬含量的策略。
策略：樣品經(jīng)混合酸微波消解后，用電感耦合等離子體質(zhì)譜儀測定壯藥美巧杯中鉛、鎘、砷、汞、銅5種重金屬的含量。
結(jié)果：該策略對各元素的檢出限為00048～00518ng/ml，回收率為87%～97%，國家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)茶葉(GBW10016)的測定值和標(biāo)準(zhǔn)值基本吻合。
結(jié)論：所建立的策略快速、準(zhǔn)確、靈敏度高，可用于測定壯藥美巧杯中5中重金屬的含量。
【關(guān)鍵詞】壯藥;美巧杯;重金屬;電感耦合等離子體質(zhì)譜法;微波消解
鉛、鎘、砷、汞、銅是目前公認(rèn)對人體有害的重金屬元素，在人體內(nèi)蓄積至一定量時(shí)可引起免疫系統(tǒng)障礙和多種功能損害，并影響人體的新陳代謝及正常的生理功能[1-3]。
而壯藥中重金屬的含量理由已是確保壯藥“安全、有效、可控”的首要理由之一。
然而由于環(huán)境污染加劇，藥材種植常使用大量化肥、農(nóng)藥等，導(dǎo)致壯藥重金屬含量超標(biāo)較為常見。
因此建立一種快速、簡便、準(zhǔn)確、環(huán)保的壯藥中重金屬的測定策略十分必要。
重金屬元素的測定策略主要有原子吸收光譜法 [4-5]、原子熒光法[6-8]、電感耦合等離子體發(fā)射光譜(ICP-AES)[9-12]、電感耦合等離子體質(zhì)譜法(ICP-MS)[13-16] 、X 射線熒光光譜法[17]等。
其中ICP-MS法克服了傳統(tǒng)策略的大多缺點(diǎn)，具有較高的靈敏度，干擾小，可同時(shí)快速測定多種元素的優(yōu)點(diǎn)，目前應(yīng)用較廣泛。
本試驗(yàn)采用微波消解-ICP-MS法同時(shí)測定壯藥美巧杯中鉛、鎘、砷、汞、銅5種重金屬的含量，不但可作為壯藥材美巧杯重金屬安全性評價(jià)的依據(jù)，而且可為壯藥美巧杯臨床用藥的安全提供參考。
1儀器與材料
11儀器電子分析天平(瑞士Mettler AE240)，7700型電感耦合等離子體質(zhì)譜儀(美國Agilent公司)，Multiwate3000高性能微波樣品制備儀(奧地利Anton Paar公司)。
12材料鉛、鎘、砷、汞、銅元素標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度均為1000μg/ml，購于國家鋼鐵材料測試中心鋼鐵研究總院及中國計(jì)量科學(xué)研究院;內(nèi)標(biāo)混合液濃度為100μg/ml，由美國Agilent公司提供，使用前用一級純化水稀釋100倍;過氧化氫、硝酸均為優(yōu)級純;水為純化水。
10批美巧杯樣品均收集于廣西，其原植物經(jīng)本所黃桂華副主任藥師鑒定為大戟科植物白桐樹Claoxylon polot(Burm) Merr[C Indicum(Reinew ex Blume) Hassk]，樣品批號、收集地點(diǎn)為：20101102(廣西隆安縣龍虎山);20101124(廣西南寧高峰林場);20110506(廣西南寧市郊雙定村);20110513(廣西隆安縣龍虎山自然保護(hù)區(qū));20101125(廣西隆安縣屏山鄉(xiāng)雅力村);20101126(廣西大新縣全茗鎮(zhèn)靈熬村);20110221(廣西靖西縣);20110310(廣西柳江縣);20110325(廣西金秀縣);20110326(廣西三江縣)。
2策略與結(jié)果
21供試品溶液的制備稱取供試品粉末05g置消解罐中，精密加入5ml硝酸、2ml過氧化氫，蓋好安全閥后，將消解罐放入消解系統(tǒng)中，按照表1設(shè)置微波消解條件消解樣品，消解完畢后，用一級純化水將內(nèi)容物轉(zhuǎn)入50ml量瓶中并定容至刻度，混勻。
同法制備試劑空白溶液。
22儀器參數(shù)條件ICP-MS儀器的工作參數(shù)為儀器全自動(dòng)調(diào)諧優(yōu)化給出，滿足儀器安裝標(biāo)準(zhǔn)要求的靈敏度、背景、氧化物、雙電荷、穩(wěn)定性等各項(xiàng)指標(biāo)，經(jīng)調(diào)諧后的儀器參數(shù)設(shè)置如表2所示。
23策略學(xué)考察
231內(nèi)標(biāo)及同位素的選擇試驗(yàn)內(nèi)標(biāo)及待測元素同位素的選擇依照2010年版《中國藥典》(一部)規(guī)定的策略[18]，選63Cu、75As、114Cd、202Hg 、208Pb及作為待測同位素，其中所選72Ge作為63Cu、75As的內(nèi)標(biāo)元素，115In作為114Cd的內(nèi)標(biāo)元素，209Bi作為202Hg 、208Pb的內(nèi)標(biāo)元素。
232標(biāo)準(zhǔn)曲線的制定及檢出限的確定分別量取鉛、鎘、砷、汞、銅元素標(biāo)準(zhǔn)溶液適量，用10%硝酸溶液(V/V)逐級稀釋成含Pb、Cd、As濃度為0、25、5、10、20ng/ml;Cu濃度為0、50、100、200、400ng/ml;Hg濃度為0、05、1、2、5ng/ml的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液系列。
以相應(yīng)元素的濃度為橫坐標(biāo)，以相應(yīng)元素與所選內(nèi)標(biāo)元素響應(yīng)值比——相應(yīng)離子每秒計(jì)數(shù)值(CPS)比為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
重復(fù)測定空白溶液11次，得出5種元素的檢出限。
各元素的回歸方程和檢出限見表3。
233精密度試驗(yàn)將混合標(biāo)準(zhǔn)品溶液(Pb、Cd、As各25ng/ml，Hg 05ng/ml，Cu 50ng/ml)，連續(xù)進(jìn)6針，計(jì)算RSD分別為：25%、163%、262%、36%、325%。
234重復(fù)性試驗(yàn)取樣品批號為20101102的供試品溶液，平行測定6次，計(jì)算RSD分別為：672%、234%、492%、823%、315%。
234回收率試驗(yàn)取已知含量的樣品(批號為20101102)粉末6份，每份05g，分別置消解罐中，精密加入鉛、砷標(biāo)準(zhǔn)溶液各05μg、鎘標(biāo)準(zhǔn)溶液025μg、銅標(biāo)準(zhǔn)溶液10μg、汞標(biāo)準(zhǔn)溶液0015μg及5ml硝酸、2ml過氧化氫，蓋好安全閥后，將消解罐放入消解系統(tǒng)中，按照表1設(shè)置微波消解條件消解樣品，消解完畢后，用一級純化水將內(nèi)容物轉(zhuǎn)入50ml量瓶中并定容至刻度，混勻，即得。
各元素平均回收率見表4。
235標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)茶葉(GBW10016)的分析取國家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)茶葉(GBW10016)6份，按“21”項(xiàng)下的策略操作，對鉛、鎘、砷、汞、銅元素含量進(jìn)行測定，結(jié)果見表5。
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