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大黃酸對高脂血癥小鼠肝臟脂肪含量的影響
大黃酸對高脂血癥小鼠肝臟脂肪含量的影響
【摘要】 目的: 觀察大黃酸對高脂誘導(dǎo)的高脂血癥小鼠肝臟脂肪含量調(diào)節(jié)作用。
方法: 以高脂肪飲食誘導(dǎo)制作小鼠高脂血癥模型,高脂血癥模型隨機分為大黃酸組(6只)、模型組(6只),同齡C57BL/6正常小鼠為對照組(6只)。
治療8周后,觀察各組的體質(zhì)量增長率,攝食量,肝臟脂肪含量,血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT),谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)和血肌酐(SCr)。
結(jié)果: 模型組和大黃酸組的進食量較對照組低(P<0.01),而大黃酸組的進食量與模型組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。
實驗結(jié)束時,對照組、模型組和大黃酸組的體質(zhì)量平均增長率分別為1.79%,10.69%,6.23%,大黃酸組體質(zhì)量平均增長率較模型組明顯降低(P<0.01)。
對照組、模型組和大黃酸組的肝臟脂肪含量分別為2.71%,16.49%,8.36%,大黃酸組的肝臟脂肪含量較模型組明顯降低(P<0.01)。
3組治療后的AST,ALT和SCr水平差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。
結(jié)論: 大黃酸有抑制脂肪在肝臟沉積的作用,且不良反應(yīng)小。
【關(guān)鍵詞】 大黃酸; 高脂血癥; 小鼠
[Abstract] Objective: To observe the regulation of rhein on the hyperlipidemia mouse model induced by high fat diet. Methods:
The hyperlipidemia mouse models induced by high fat diet were performed successfully and were randomly divided into rhein group (6 mice), model group (6 mice) and control group (6 mice) were normal C57BL/6 mice. After treatment of 8 weeks, growth rate in body weight, food intake, liver fat content, serum alanine aminotransferase (ALT), aspartate aminotransferase (AST) and serum creatinine (SCr) were observed. Results:
The food-intake in model group and rhein group decreased than those in control group (P<0.01), while there was no significant difference between model group and rhein group (P>0.05). At the end of the experiment, the average weight growth rate in control group was 1.79%, while it was 10.69% in model group and 6.23% in rhubarb group.
The average weight growth rate in rhein group was significantly lower than that in model group (P<0.01).
The liver fat content is 2.71% in control group, 16.49% in model group, while it was 8.36% in rhubarb group; the liver fat content was significantly lower than that in model group (P<0.01). After treatment, the levels of AST, ALT, and SCr in three groups were no significant differences (P>0.05). Conclusion: Rhein have the function of inhibiting fat deposition in the liver, and the toxic side effects were very low.
[Key words] rhein; hyperlipidemia; mouse
心血管疾病在我國居于死亡原因的第一位或第二位,其中冠心病的發(fā)病與死亡率正在上升,高脂血癥是動脈粥樣硬化的一個促發(fā)因素,被認為是“無聲殺手”。
大黃酸(rhein)是從中藥大黃蒽醌衍生物中分離出來的一種單體組分,大量實驗研究表明,大黃具有減輕體質(zhì)量,改善血脂的作用[1]。
本實驗采用大黃酸治療高脂誘導(dǎo)小鼠模型,取得了較滿意的療效,現(xiàn)報告如下。
1 材料與方法
1.1 動物及飼料
C57BL/6小鼠,雌性,體質(zhì)量20~30 g,SPF級動物房飼養(yǎng),購自上海萊克實驗動物有限公司,生產(chǎn)許可證號:SCXK (滬)2003-0080;使用許可證號:SYXK(滬)2003-0024。
普通飼料為復(fù)旦大學(xué)動物中心提供的標準顆粒飼料;高脂肪飼料由南京中醫(yī)藥大學(xué)動物飼料廠提供,其配方為膽固醇(3 g?kg-1)+蛋黃粉(100 g?kg-1)+豬油(100 g?kg-1)+基礎(chǔ)飼料(792 g?kg-1)+膽酸鹽(5 g?kg-1)。
1.2 藥物和試劑
大黃酸由中國藥科大學(xué)提供,經(jīng)HPLC檢驗純度在98%以上,使用時用1%纖維素鈉溶解。
1.3 實驗儀器
MD-100型生化自動分析儀、恒溫水浴鍋、索氏提取器、電子分析天平、滴定架、萬能夾等;索氏脂肪提取器:北京玻璃設(shè)備廠生產(chǎn); 80-28型離心機:上海安亭科學(xué)儀器廠制造。
1.4 實驗方法
1.4.1 動物模型建立與給藥
高脂血癥小鼠模型:連續(xù)喂以高脂肪飼料4周。
預(yù)試驗表明該高脂肪飼料配方有效,可以成功建立高脂血癥模型。
將高脂血癥模型小鼠隨機分為大黃酸組(6只)和模型組(6只),同齡C57BL/6正常小鼠為對照組(6只)。
對照組與模型組分別予生理鹽水(10 ml?kg-1?d-1)灌胃,大黃酸組予大黃酸100 mg?kg-1?d-1,分別灌胃8周。
1.4.2 觀察指標
、 體質(zhì)量增長率:實驗前和實驗結(jié)束時,對小鼠進行稱重,體質(zhì)量增長率(%)=增加的體質(zhì)量/實驗前的體質(zhì)量×100%。
、 攝食量:分別記錄每周每日平均進食量。
、 肝臟脂肪含量: 取新鮮肝組織0.5 g,用無水硫酸鈉研磨成粉,再放入索氏提取器中,用無水乙醚萃取肝臟中的脂肪[2]。
、 谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)和血肌酐(SCr)的測定:實驗結(jié)束時,處死小鼠心臟取血,離心后收集上清液檢測ALT,AST和SCr的水平。
1.5 統(tǒng)計學(xué)處理
采用SPSS15.0軟件。
計量資料以均數(shù)±標準差(x±s)表示,3組間比較采用方差分析,組間比較采用q檢驗,檢驗水準α=0.05。
2 結(jié)果
2.1 各組小鼠平均進食量比較
見圖1,模型組和大黃酸組的進食量較對照組低(P<0.01),而大黃酸組的進食量與模型組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。
圖1 各組小鼠1~8周的平均進食量
2.2 實驗結(jié)束時各組的平均體質(zhì)量增長率比較
從表1可知,實驗結(jié)束時,對照組、模型組和大黃酸組的體質(zhì)量平均增長率為1.79%,10.69%,6.23%,3組間比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
大黃酸組和模型組小鼠體質(zhì)量平均增長率顯著高于對照組( q分別為4.551和9.089,P均<0.01),而大黃酸組顯著低于模型組(q=4.367,P<0.01)。
表1 實驗結(jié)束時各組檢測指標比較
2.3 各組肝臟平均脂肪含量的比較
從表1可知,實驗結(jié)束時對照組、模型組和大黃酸組的肝臟脂肪含量分別為2.71%,16.49%,8.36%,3組之間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。
大黃酸組和模型組小鼠肝臟脂肪含量顯著高于對照組(q分別為5.503和13.325,P均<0.01),而大黃酸組顯著低于模型組(q=8.288,P<0.01)。
2.4 大黃酸對肝腎功能的影響
見表1,3組治療結(jié)束后,AST,ALT和SCr水平差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。
3 討論
血脂是指人體血漿中所含的人體脂質(zhì)成分,血脂過高稱為高脂血癥。
高脂飲食是導(dǎo)致高脂血癥的因素之一,高脂血癥常因為血脂在體內(nèi)的過剩可引起肝細胞脂肪變性,脂肪酸損害肝細胞,從而導(dǎo)致脂肪肝、肝硬化、膽石癥等一系列疾病。
調(diào)整血脂水平、改善脂質(zhì)代謝是防治動脈硬化的關(guān)鍵[3]。
高脂血癥是代謝紊亂的標志,也是脂肪肝的主要誘因之一。
因此,尋找高效低毒的降脂藥物,特別是天然藥物受到眾多藥理學(xué)家和醫(yī)務(wù)人員的重視。
大黃酸為蒽醌衍生物的單體,主要分布于蓼科植物中,是大黃、何首烏、虎杖等多種中藥的主要有效成份之一。
研究發(fā)現(xiàn),大黃酸可抑制人前體脂肪細胞增殖與分化,該作用可能與分化抑制基因(CHOP)表達上調(diào)有關(guān)[4-5]。
大黃酸能降低糖尿病肥胖大鼠脂肪組織抵抗素表達,具有降低血漿游離脂肪酸和調(diào)脂的作用[6]。
證明其改善胰島素抵抗的機制主要可能與改善脂肪激素或因子對胰島素信號傳導(dǎo)影響和阻止脂肪轉(zhuǎn)移有關(guān)。
大黃酸是人口服大黃水提物后惟一的一種能夠在血漿中檢測到的中藥活性成分,可用于制作口服制劑而不需特殊加工處理。
本實驗結(jié)果表明,模型組、大黃酸組與對照組相比進食量略低,這可能與高脂飼料喂養(yǎng)有關(guān)。
實驗結(jié)束時,大黃酸組和模型組小鼠體質(zhì)量平均增長率顯著高于對照組,而大黃酸組顯著低于模型組,說明大黃酸能抑制高脂模型小鼠的體質(zhì)量增長,這可能與大黃酸抑制脂肪細胞增殖與分化有關(guān)。
實驗結(jié)束時3組間的肝臟脂肪含量比較結(jié)果說明大黃酸有抑制脂肪在肝臟沉積的作用。
上述結(jié)果說明,大黃酸能夠調(diào)節(jié)體內(nèi)紊亂的脂質(zhì)平衡,并具有治療動脈粥樣硬化和脂肪肝等疾病的潛在作用。
同時本研究中3組治療結(jié)束后,AST,ALT和SCr水平差異無統(tǒng)計學(xué)意義,說明大黃酸對肝腎功能沒有明顯的影響,無明顯的不良反應(yīng)。
【參考文獻】
[ 1 ] 李曉紅,李蒙,陶艷蓉.大黃酸及其衍生物藥理作用研究新進展[J]. 現(xiàn)代藥物與臨床,2010,25(6):417-421.
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[ 3 ] 周筱瓊,于小妹,葉雄偉,等. 高脂血癥患者血漿致動脈粥樣硬化指數(shù)與血栓形成危險因子的相關(guān)性[J]. 中國動脈硬化雜志,2010,18(10):799-802.
[ 4 ] 楊永青,楊公社.大黃酸對大鼠前體脂肪細胞增殖與分化的影響[J].中國藥學(xué)雜志,2007,42(15):1148-1151.
[ 5 ] 袁小青,馬向華,丁亞琴,等.大黃酸對人前體脂肪細胞增殖與分化的影響[J].南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報:自然科學(xué)版,2009,29(2):161-165.
[ 6 ] 劉慶陽,于世家.大黃酸對糖尿病肥胖大鼠脂肪組織抵抗素基因表達及血漿游離脂肪酸水平的影響[J].中華中醫(yī)藥雜志,2009,24(8):1061-1063.
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