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藥學(xué)畢業(yè)論文

不同白英藥材中總皂苷含量差異探究論文

時(shí)間:2022-10-01 01:31:49 藥學(xué)畢業(yè)論文 我要投稿
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不同白英藥材中總皂苷含量差異探究論文

  白英為茄科植物Solanum lyratum Thunb.的干燥全草,性微寒,味苦。最早見于《本經(jīng)》記載,列為上品,為傳統(tǒng)中藥,具有清熱解毒、祛風(fēng)化痰、除濕等功效,用于治療癌癥腫瘤、皰疹、瘧疾、黃疸、水腫、淋病、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、白帶異常等病證。

不同白英藥材中總皂苷含量差異探究論文

  不同白英藥材中總皂苷含量差異探究論文

  【摘要】 目的建立白英中總皂苷的含量測(cè)定方法。

  方法選用薯蕷皂苷元為對(duì)照品,采用分光光度法,高氯酸顯色,在410 nm處測(cè)定吸光度,計(jì)算白英中總皂苷含量。

  結(jié)果薯蕷皂苷元的質(zhì)量濃度在8.91~29.70μg/ml范圍內(nèi)與吸光度值呈良好線性關(guān)系(r=0.999 2),方法的平均回收率為95.9%(n=9),RSD為1.5%;不同來(lái)源的白英藥材中總皂苷含量有較大差異。

  結(jié)論該方法操作簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、靈敏、重現(xiàn)性好,可用于白英藥材的質(zhì)量控制。

  【關(guān)鍵詞】 白英 總皂苷 薯蕷皂苷元 分光光度法

  白英為茄科植物Solanum lyratum Thunb.的干燥全草,性微寒,味苦。

  最早見于《本經(jīng)》記載,列為上品,為傳統(tǒng)中藥,具有清熱解毒、祛風(fēng)化痰、除濕等功效,用于治療癌癥腫瘤、皰疹、瘧疾、黃疸、水腫、淋病、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、白帶異常等病證。

  白英含有多種化學(xué)成分,主要有甾體皂苷類、甾體生物堿類、有機(jī)酸類等化合物,其中皂苷類成分主要包括以薯蕷皂苷元、替高皂苷元、雅姆皂苷元等皂苷元為非糖部分的多種甾體皂苷。

  藥理研究顯示白英中總皂苷體內(nèi)外具有一定的抗腫瘤作用,且存在一定的選擇性。

  因此,測(cè)定白英中總皂苷的含量對(duì)評(píng)價(jià)白英藥材質(zhì)量具有重要意義。

  總皂苷的測(cè)定方法有重量法,UV,TLCS,HPLC,GC-MS法。

  目前有關(guān)白英中總皂苷的含量測(cè)定尚未見報(bào)道,本文建立了用UV測(cè)定白英中總皂苷含量的方法,并比較了24種不同來(lái)源的白英中總皂苷的含量,為白英的質(zhì)量控制提供一定的依據(jù)。

  一、儀器與材料

  紫外分光光度計(jì)(上海棱光技術(shù)有限公司)、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器 (RE-52AA,上海亞榮儀器廠)、水浴鍋(鞏義市杜甫儀器廠)。

  薯蕷皂苷元標(biāo)準(zhǔn)品(中國(guó)藥品生物制品檢定所提供,I539-200001,含量測(cè)定用),無(wú)水乙醇(AR,天津百盛化工有限公司),甲醇(AR,山東禹王實(shí)業(yè)有限公司),三氯甲烷(AR,沈陽(yáng)經(jīng)濟(jì)技術(shù)開發(fā)區(qū)試劑廠),鹽酸(AR,天津市大茂化學(xué)試劑廠),高氯酸(AR,天津市東方化工廠)。

  24種不同來(lái)源的白英藥材均由沈陽(yáng)藥科大學(xué)孫啟時(shí)教授鑒定為茄科植物Solanum lyratum Thunb. 的干燥全草。

  二、方法與結(jié)果

  2.1 對(duì)照品溶液的制備精密稱定薯蕷皂苷元對(duì)照品約3 mg,置于10 ml容量瓶中,加甲醇溶解并定容即得。

  2.2 樣品溶液的制備精密稱定1.0 g白英藥材,置索氏提取器內(nèi),加60 ml三氯甲烷脫脂2 h后,揮去三氯甲烷溶劑;用200 ml 80%乙醇在80℃下提取至無(wú)色,

  將乙醇液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至干;殘?jiān)?.5 mol·L-1鹽酸50 ml加熱回流3 h,過(guò)濾;冷卻后用三氯甲烷分3次(30,20,20 ml)回流萃取,15 min/次;合并三氯甲烷萃取液,水洗至中性,水洗液再加入20 ml三氯甲烷萃取,合并三氯甲烷萃取液,水浴蒸干溶劑,殘?jiān)眉状既芙獠⒍ㄈ葜?0.0ml即得。

  2.3 吸收光譜的測(cè)定分別精密量取薯蕷皂苷元對(duì)照品溶液與樣品溶液1.0 ml,置水浴中揮干溶劑,精密加入10.0 ml高氯酸,搖勻。

  65℃水浴加熱15 min,取出立即置于冰水浴中15 min后,以空白作參比,在200~600 nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)繪制吸收曲線,薯蕷皂苷元在405 nm處有最大吸收,樣品溶液在405~412 nm處有較強(qiáng)吸收,故選擇410 nm作為測(cè)定波長(zhǎng)。

  2.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備精密吸取對(duì)照品溶液0.3,0.4,0.6,0.8,1.0 ml,分別置于三角瓶中,揮干溶劑,精密加入10.0 ml高氯酸,搖勻。

  65℃水浴加熱顯色15 min,取出后立即置于冰水浴中15 min后停止反應(yīng),以空白作參比,在410 nm處測(cè)定吸光度值。

  計(jì)算得回歸方程為A=0.027 6C+0.005 5,r=0.999 2,結(jié)果表明薯蕷皂苷元在8.91~29.70 μg/ml范圍內(nèi)與吸光度呈良好的線性關(guān)系。

  2.5 正交實(shí)驗(yàn)法對(duì)制備樣品溶液的優(yōu)選本實(shí)驗(yàn)選定鹽酸濃度(mol/L)、乙醇體積分?jǐn)?shù)(%)、水解時(shí)間(h)作為考察因素,每個(gè)因素各取3個(gè)水平,以總皂苷含量為評(píng)價(jià)指標(biāo),應(yīng)用L9(34)正交表安排實(shí)驗(yàn)。

  因素水平表見表1,正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表2。

  通過(guò)直觀分析表明:影響因素的主次順序?yàn)樗鈺r(shí)間>鹽酸濃度>乙醇體積分?jǐn)?shù),經(jīng)過(guò)分析,選擇優(yōu)化條件為:水解時(shí)間3 h,鹽酸濃度2.5 mol/L,乙醇體積分?jǐn)?shù)80%。

  2.6 穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)確吸取樣品溶液1.0 ml,按“吸收光譜的測(cè)定”項(xiàng)下顯色,于410 nm波長(zhǎng)處每隔10 min測(cè)定其吸光度,結(jié)果表明樣品溶液的RSD為0.4%,樣品溶液顯色后在60 min內(nèi)穩(wěn)定性良好。

  2.7 精密度實(shí)驗(yàn)精密吸取對(duì)照品溶液1.0 ml,共5份,按“吸收光譜的測(cè)定”項(xiàng)下顯色,410 nm波長(zhǎng)處測(cè)定,RSD為0.8%。

  實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,方法的精密度良好。

  2.8 重復(fù)性實(shí)驗(yàn)取樣品5份,按樣品溶液的制備法和顯色法,依法測(cè)定,計(jì)算樣品中總皂苷含量。

  平均總皂苷含量2.12 mg·g-1,RSD=1.4%(n=5),表明方法的重復(fù)性良好。

  2.9 回收率實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)確稱取一定量已知總皂苷含量的白英樣品,每份0.5 g,加入一定量的薯蕷皂苷元對(duì)照品,按樣品溶液的制備和測(cè)定步驟進(jìn)行,計(jì)算得回收率。

  2.10 樣品的測(cè)定準(zhǔn)確吸取樣品溶液1.0 ml,按“吸收光譜的測(cè)定”項(xiàng)下進(jìn)行測(cè)定。

  分別測(cè)定了24種不同來(lái)源的白英藥材中總皂苷的含量。

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  從上表中可以得出:不同來(lái)源的白英中總皂苷含量不同,產(chǎn)于江蘇與昆明的白英中總皂苷含量最高。

  三、討論

  皂苷一般易溶于熱水、含水乙醇、熱甲醇、熱乙醇,幾乎不溶或難溶于乙醚、苯、石油醚等極性較小的有機(jī)溶劑。

  考慮到甲醇對(duì)身體有害,無(wú)水乙醇提取不完全等因素,選擇乙醇水溶液作為提取溶劑。

  根據(jù)文獻(xiàn)選用含一定濃度的甲醇水溶液和石油醚(氯仿)回流提取,用TLC檢查得不到薯蕷皂苷元的斑點(diǎn)。

  原因是苷類水解時(shí)有醇存在,長(zhǎng)時(shí)間加熱可引起其他副反應(yīng),皂苷元往往會(huì)發(fā)生脫水、環(huán)合、雙鍵位移和構(gòu)型改變等變化。

  在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中根據(jù)文獻(xiàn)采用活性炭脫色5 min,結(jié)果測(cè)定吸光度值非常小,原因是活性炭吸附某些苷類物質(zhì)。

  比色法所顯顏色隨顯色溫度和時(shí)間變化而變化,因此,必須嚴(yán)格控制條件,盡量排除干擾。

  本實(shí)驗(yàn)選用的顯色條件穩(wěn)定。

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