注射用頭孢西丁鈉含量測定方法的改進(jìn)

　　畢業(yè)論文是檢驗在校學(xué)習(xí)成果的重要文檔，如何寫好畢業(yè)論文也成為每個即將畢業(yè)的學(xué)子最關(guān)心的事情之一，可以參考一些優(yōu)秀的論文范文

　　【摘要】 目的 采用離子對色譜法測定注射用頭孢西丁鈉的含量，為完善注射用頭孢西丁鈉質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供依據(jù)。方法 采用離子對色譜法，色譜柱為Agilent ZORBAX 80A Extend C18柱(150 mm×4.6 mm，5μm );流動相為5 mmol·L-1氫氧化四丁基銨溶液?乙腈(體積比750∶250);檢測波長254 nm;流速為1 mL·min-1。結(jié)果 頭孢西丁的質(zhì)量在0.310 1～3.101 0 μg范圍內(nèi)與峰面積線性關(guān)系良好，r=0.999 98;平均回收率為100.2%，RSD為1.05%。結(jié)論 本文方法簡單、準(zhǔn)確、重復(fù)性好，為完善注射用頭孢西丁鈉含量測定方法提供了依據(jù)。

　　【關(guān)鍵詞】 頭孢西丁鈉;離子對色譜法;含量測定

　　頭孢西丁為β?內(nèi)酰胺類抗生素，由美國默沙東公司開發(fā)并于1974年上市。頭孢西丁抗菌作用和抗菌譜同第二代頭孢菌素，但對厭氧菌特別是脆弱擬桿菌的作用更強(qiáng)，對β?內(nèi)酰胺酶穩(wěn)定。臨床上用于腹膜炎和其他腹腔內(nèi)、盆腔內(nèi)、婦科感染、敗血癥、心內(nèi)膜炎、尿路感染(包括淋病)、呼吸道感染、骨關(guān)節(jié)軟組織感染。采用注射用頭孢西丁鈉的國家標(biāo)準(zhǔn)[1,2]及相關(guān)文獻(xiàn)[3,4]方法測定頭孢西丁的含量，結(jié)果頭孢西丁的理論塔板數(shù)較低，色譜峰拖尾較嚴(yán)重。本文采用離子對色譜(IPC)法測定頭孢西丁的含量，能較大程度地提高頭孢西丁的理論塔板數(shù)，改善色譜峰拖尾現(xiàn)象，且操作簡便易行，結(jié)果重現(xiàn)性好，專屬性強(qiáng)。

　　1 儀器與試藥

　　島津LC2010A/C型高效液相色譜儀，Class?VP色譜工作站,METTLER TOLEDO十萬分之一電子天平。

　　乙腈為色譜純，實驗用水為超純水，磷酸、磷酸二氫鉀、磷酸氫二鈉、10%四丁基氫氧化銨溶液為分析純。頭孢西丁對照品(批號130572?200701，質(zhì)量分?jǐn)?shù)為95.3%,供含量測定用，中國藥品生物制品檢定所)，注射用頭孢西丁鈉(康田制藥(中山)有限公司，批號0711011、0711012、0711013)。

　　2 測定方法的建立

　　2.1 色譜條件

　　色譜柱：Agilent ZORBAX 80A Extend?C18柱(150 mm×4.6 mm，5 μm);流動相：5 mmol·L-1氫氧化四丁基銨溶液(取10%四丁基氫氧化銨溶液13.2 mL，加水900 mL后，用1 mol·L-1磷酸溶液調(diào)節(jié)pH值至4.0，再用水稀釋至1 000 mL)?乙腈(體積比750∶250);檢測波長254 nm;流速為1 mL·min-1;進(jìn)樣量5 μL。在此條件下供試品和對照品的高效液相色譜圖見圖1、圖2。

　　2.2 供試品溶液的制備[1,2]

　　取本品內(nèi)容物，精密稱取適量(約相當(dāng)于頭孢西丁15 mg)置50 mL量瓶中，用磷酸鹽緩沖液(稱取磷酸二氫鉀1.0 g和磷酸氫二鈉1.8 g，加水900 mL使溶解，用磷酸或10 mol·L-1氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH至7.0，再用水稀釋至1 000 mL，搖勻)溶解并稀釋至刻度，制成每1 mL中約含頭孢西丁0.3 mg的溶液，作為供試品溶液。

　　2.3 對照品儲備液的制備

　　取頭孢西丁對照品適量，精密稱定，加磷酸鹽緩沖液制成0.6 mg·mL-1的對照品儲備液。

　　2.4 線性關(guān)系

　　分別精密量取質(zhì)量濃度為0.620 2 mg·mL-1頭孢西丁對照品儲備液1、2、5、6、8 mL，加磷酸鹽緩沖液稀釋成質(zhì)量濃度為0.062 02～0.620 2 mg·mL-1的對照品溶液，按“2.1”項下的色譜條件進(jìn)行測定。以質(zhì)量(m)為橫坐標(biāo)，各自峰面積(A)為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,得回歸方程為

　　A=1.277×106m+9.774×103，r=0.999 9(n=6)

　　結(jié)果表明頭孢西丁的質(zhì)量在0.310 1～3.101 0 μg范圍內(nèi)與峰面積呈良好的線性關(guān)系。

　　2.5 精密度試驗

　　取質(zhì)量濃度為0.3 mg·mL-1的對照品溶液，按“2.1”項下的色譜條件進(jìn)行測定，重復(fù)進(jìn)樣5次，測得頭孢西丁峰面積的RSD為0.57%，表明試驗精密度良好。

　　2.6 穩(wěn)定性試驗

　　取同一批號供試品溶液于0、1、2、3、4、5、6 h內(nèi)按“2.1”項下的色譜條件進(jìn)行測定，測得頭孢西丁峰面積的RSD為0.98%，表明供試品溶液在6 h內(nèi)基本穩(wěn)定。

　　2.7 重復(fù)性試驗

　　取同一批號樣品，分別按“2.2”項下的方法平行制備6份供試品溶液，按“2.1”項下的色譜條件進(jìn)行測定，頭孢西丁的平均含量為94.26%，RSD為0.29%，表明方法重復(fù)性良好。

　　2.8 回收率試驗

　　精密稱取已知含量的樣品5份，按“2.2”項下的方法制成每1 mL中約含頭孢西丁1 mg的供試品溶液，分別精密吸取3 mL供試品溶液置5個20 mL的容量瓶中，再分別精密加入已知濃度的對照品溶液10 mL，加磷酸鹽緩沖液溶解并稀釋至刻度，搖勻，按“2.1”項下的色譜條件進(jìn)行測定，結(jié)果頭孢西丁的平均回收率為100.4%，RSD為1.05%。見表1。表1 頭孢西丁加樣回收率試驗

　　2.9 樣品測定

　　取3批樣品，按“2.2”項下的方法制備供試品溶液，按“2.1”項下的色譜條件進(jìn)行測定，以外標(biāo)法計算頭孢西丁的含量。結(jié)果3批樣品中頭孢西丁的平均百分含量分別為94.43%,94.71%，93.59%。

　　3 討 論

　　3.1 檢測波長的選擇

　　參照注射用頭孢西丁鈉的國家標(biāo)準(zhǔn)[1，2]，選擇254 nm為檢測波長。

　　3.2 流動相中氫氧化四丁基銨濃度的選擇[5]

　　以水?乙腈(體積比750∶250)為流動相，分別考察流動相中氫氧化四丁基銨濃度依次為0 、2.5、5、10及20 mmol·L-1時對頭孢西丁色譜行為的影響。結(jié)果表明，當(dāng)流動相中氫氧化四丁基銨濃度為5 mmol·L-1時，頭孢西丁的理論塔板數(shù)和拖尾因子最理想，故氫氧化四丁基銨濃度采用5 mmol·L-1。

　　3.3 流動相的pH值選擇

　　以5 mmol·L-1氫氧化四丁基銨溶液?乙腈(體積比750∶250)為流動相，改變其pH值，考察pH值對頭孢西丁的色譜行為的影響。結(jié)果表明，在pH 4.0時頭孢西丁峰的理論塔板數(shù)最大及拖尾因子最小，故流動相的pH值選擇4.0。

　　3.4 方法耐用性考察

　　分別對不同廠牌型號的色譜柱進(jìn)行考察，并與國家藥品標(biāo)準(zhǔn)的色譜條件進(jìn)行比較,結(jié)果見表2。由表2可見，采用國家藥品標(biāo)準(zhǔn)[1，2]的流動相試驗達(dá)不到國家標(biāo)準(zhǔn)[1]所規(guī)定的要求(理論塔板數(shù)按頭孢西丁峰計算應(yīng)不低于2 800，拖尾因子應(yīng)不大于1.5);只有使用新的色譜柱才能達(dá)到要求;用改進(jìn)后的方法測定，使用不同的色譜柱和不同的高效液相色譜儀均能達(dá)到國家標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)定，表明本文方法耐用性、重現(xiàn)性良好。表2 方法耐用性考察注：編號1-6采用島津LC2010A/C型高效液相色譜儀;編號7-8采用Agilent LC1100高效液相色譜儀

　　【參考文獻(xiàn)】

　　[1] 國家食品藥品監(jiān)督管理局.YBH14042005國家藥品標(biāo)準(zhǔn)[S].

　　[2] 國家食品藥品監(jiān)督管理局.YBH17442006國家藥品標(biāo)準(zhǔn)[S].

　　[3] 王秀萍，費瀚雨，儲潼.HPLC法測定注射用頭孢西丁鈉的含量[J].中國藥師，2007(01):46-47.

【注射用頭孢西丁鈉含量測定方法的改進(jìn)】相關(guān)文章：

煙酰胺的含量測定方法10-08

氯苯那敏含量測定方法學(xué)10-08

羥苯磺酸鈣膠囊不同含量測定方法的比較10-06

注射用頭孢呋辛鈉質(zhì)量10-05

氯氣與鈉反應(yīng)實驗的改進(jìn)10-08

注射用頭孢米諾鈉合理用藥臨床10-05

鐵礦石磁性鐵含量的測定分析論文10-09

試驗條件對紡織品甲醛含量測定的影響探討10-06

三花龍膽中不同部位龍膽苦苷的含量測定10-08