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羥苯磺酸鈣膠囊不同含量測(cè)定方法的比較
畢業(yè)論文無(wú)論對(duì)普通大學(xué)畢業(yè)生還是成教畢業(yè)生都是個(gè)撓頭的問(wèn)題，開(kāi)題報(bào)告、參考文獻(xiàn)等等都是讓人十分煩惱的事情，下面YJBYS小編為大家?guī)?lái)自考醫(yī)學(xué)專(zhuān)業(yè)論文，歡迎閱讀!
【摘要】 目的 建立UV吸收系數(shù)法和HPLC法測(cè)定羥苯磺酸鈣膠囊的含量，并與文獻(xiàn)方法進(jìn)行比較。方法①UV吸收系數(shù)法:溶劑為水，測(cè)定波長(zhǎng)為301 nm，吸收系數(shù)Ε1%1 cm為188(以C12H10CaO10S2計(jì));②UV對(duì)照品法:溶劑為水，測(cè)定波長(zhǎng)為301 nm;③鈰量滴定法;④HPLC法:以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，0.2%磷酸二氫鉀?甲醇(體積比90∶10)為流動(dòng)相;檢測(cè)波長(zhǎng)為301 nm。 結(jié)果 UV吸收系數(shù)法、UV對(duì)照品法和鈰量滴定法3種方法的結(jié)果基本一致，HPLC法測(cè)定結(jié)果較其他3種方法的低。結(jié)論 HPLC法的可以有效分離可能存在的降解產(chǎn)物，比其他3種方法更能有效反映產(chǎn)品的真實(shí)質(zhì)量，有利于產(chǎn)品的質(zhì)量控制。
【關(guān)鍵詞】 羥苯磺酸鈣膠囊;高效液相色譜法;紫外吸收系數(shù)法
2,5?羥苯磺酸鈣(羥苯磺酸鈣)，是一種微循環(huán)血管改善劑，能選擇性作用于毛細(xì)血管壁，調(diào)節(jié)和改善毛細(xì)血管的滲透性和脆性，主要用于各種原因引起的毛細(xì)血管疾病，是目前唯一防治糖尿病視網(wǎng)膜病變的有效藥物。
目前，對(duì)本品的含量測(cè)定文獻(xiàn)報(bào)道的有UV對(duì)照品法[1，2]和鈰量滴定法[3]，本文建立UV吸收系數(shù)法和HPLC法用于本品的含量測(cè)定，并與文獻(xiàn)方法進(jìn)行比較分析，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。
1 儀器與試藥
日本島津UV?2450紫外分光光度計(jì)，Waters2996 Series高效液相色譜儀,Mettler100型電子天平。羥苯磺酸鈣對(duì)照品(質(zhì)量分?jǐn)?shù)：95.0%，批號(hào)：100573-200401，由中國(guó)藥品生物制品檢定所提供)，羥苯磺酸鈣膠囊(批號(hào)：0705301、0705302、0705303，規(guī)格：500 mg，由國(guó)內(nèi)某藥廠(chǎng)提供)，對(duì)苯二酚(廣州化學(xué)試劑廠(chǎng))，甲醇為色譜純，磷酸二氫鉀為分析純。
2 UV吸收系數(shù)法
2.1 測(cè)定方法
取本品20粒內(nèi)容物，精密稱(chēng)定，研細(xì)，混合均勻，精密稱(chēng)取適量(約相當(dāng)于羥苯磺酸鈣100 mg)，置100 mL量瓶中，加水適量振搖使溶解，并加水稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液5 mL，置200 mL量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，照紫外?可見(jiàn)分光光度法(中國(guó)藥典2005年版二部附錄Ⅳ A)，在301 nm的波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度;按C12H10CaO10S2的吸收系數(shù)為188[4]計(jì)算即得。
2.2 專(zhuān)屬性考察
2.2.1 溶劑的選擇 根據(jù)文獻(xiàn)和試驗(yàn)，本品在水中極易溶解，故選用水為溶劑。
2.2.2 專(zhuān)屬性與測(cè)定波長(zhǎng)的選擇 取羥苯磺酸鈣對(duì)照品適量，加水溶解并稀釋制成每1 mL中約含羥苯磺酸鈣25 μg的溶液，照紫外-可見(jiàn)分光光度法，在250～350 nm的波長(zhǎng)范圍內(nèi)掃描。另取空白輔料和膠囊殼，同法配置成空白輔料的水溶液，在200～350 nm的波長(zhǎng)范圍內(nèi)掃描。圖譜見(jiàn)圖1。結(jié)果表明，羥苯磺酸鈣在301 nm波長(zhǎng)處有最大吸收;空白輔料和膠囊殼的水溶液在301 nm處無(wú)干擾吸收，不影響本品的測(cè)定。
2.3 線(xiàn)性試驗(yàn)
取供試品內(nèi)容物適量，精密稱(chēng)定，用水制成每1 mL中含羥苯磺酸鈣0.25 mg的溶液，分別精密量取1.0、3.0、5.0、7.0及10.0 mL，各置50 mL量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，分別制成每1 mL中含羥苯磺酸鈣5、15、25、35及50 μg的供試品溶液，分別于301 nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度，以吸光度(A)對(duì)質(zhì)量濃度(ρ)作線(xiàn)性回歸，得回歸方程：ρ=0.1236A+0.0229，r=0.999 7，n=5，表明羥苯磺酸鈣的質(zhì)量濃度在5～50 μg/mL范圍內(nèi)與吸光度線(xiàn)性關(guān)系良好。
2.4 回收率試驗(yàn)
取本品中各空白輔料，按處方比例配制，分別按標(biāo)示量的80%、100%、120%加入羥苯磺酸鈣對(duì)照品，加水適量配制成每1 mL中含羥苯磺酸鈣20、25、30 μg的溶液各3份，在301 nm的波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度，計(jì)算，測(cè)得平均回收率為99.99%(RSD為0.12%，n=9)。
2.5 重復(fù)性試驗(yàn)
取同一批號(hào)(0705301)樣品6份，按“2.1”項(xiàng)方法測(cè)定含量，結(jié)果分別為100.8%、101.2%、100.6%、101.3%、100.7%和100.9%，平均含量為100.9%，RSD為0.3%(n=6)。
2.6 穩(wěn)定性試驗(yàn)
取供試品溶液，分別于0、2、4、6、8、10 h測(cè)定吸光度，吸光度基本不變，RSD為0.3%。
3 HPLC法
3.1 色譜條件
采用Kromasil C18柱(5 μm，4.6 mm×250 mm)，以0.2%磷酸二氫鉀?甲醇(體積比90∶10)為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為301 nm。該色譜條件下，羥苯磺酸鈣的理論板數(shù)為4800，保留時(shí)間約為10 min，對(duì)苯二酚的保留時(shí)間約為14 min。見(jiàn)圖2。
3.2 專(zhuān)屬性考察
3.2.1 酸降解產(chǎn)物的檢測(cè) 取本品適量，加1 mol/L鹽酸溶液溶解并稀釋制成約2 mg/mL的溶液，放置15 h，加1 mol/L氫氧化鈉溶液中和后，進(jìn)樣，記錄色譜圖，見(jiàn)圖3。
HPLC chromatogram of sample in acid solution
3.2.2 堿降解產(chǎn)物的檢測(cè) 取本品適量，加1 mol/L氫氧化鈉溶液溶解并稀釋制成約2 mg/mL的溶液，放置15 h，加1 mol/L鹽酸溶液中和后，進(jìn)樣，記錄色譜圖，見(jiàn)圖4。
3.2.3 氧化產(chǎn)物的檢測(cè) 取本品適量，加3%過(guò)氧化氫溶液溶解并稀釋制成約1 mg/mL的溶液，放置4 h，進(jìn)樣，記錄色譜圖，見(jiàn)圖5。
3.2.4 光降解產(chǎn)物的檢測(cè)
取本品適量，加水溶解并稀釋制成約1 mg/mL的溶液，置4 500 LX光照下照射24 h，進(jìn)樣，記錄色譜圖，見(jiàn)圖6。
取本品適量，置4 500 LX光照下照射10 d，加水溶解并稀釋制成約1 mg/mL的溶液，進(jìn)樣，記錄色譜圖，見(jiàn)圖7。檢測(cè)結(jié)果顯示，各條件下的降解物質(zhì)在該色譜條件下均能達(dá)到較好的分離。
3.3 線(xiàn)性試驗(yàn)
取供試品內(nèi)容物適量，精密稱(chēng)定，用水制成每1 mL中含羥苯磺酸鈣0.202 3 mg的溶液，分別精密量取1、5、10、20、35、50及100 μL，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，以峰面積(A)對(duì)進(jìn)樣量(m)作線(xiàn)性回歸，得線(xiàn)性回歸方程
m=1.4648×10-6A-0.03717，r=0.999 9(n=7)。
3.4 回收率試驗(yàn)
取本品中各空白輔料，按處方比例配制，分別按標(biāo)示量的80%、100%、120%加入羥苯磺酸鈣對(duì)照品，加水適量配制成每1 mL中含羥苯磺酸鈣0.16、0.2、0.24 mg的溶液各3份，按“3.9”項(xiàng)方法測(cè)定，平均回收率為99.67%,RSD為0.41%(n=9)。
3.5 精密度試驗(yàn)
精密量取供試品溶液20 μL，注入液相色譜儀，重復(fù)進(jìn)樣6次，測(cè)得羥苯磺酸鈣峰面積的RSD為0.23%。
3.6 重復(fù)性試驗(yàn)
取同一批號(hào)(0705301)樣品6份，按“3.9”項(xiàng)方法測(cè)定含量，結(jié)果分別為100.9%、100.8%、100.8%、100.9%、100.3%和100.3%，平均含量為100.7%，RSD為0.3%(n=6)。
3.7 穩(wěn)定性試驗(yàn)
取供試品溶液，分別于0、2、4、6、8、10 h進(jìn)樣測(cè)定，羥苯磺酸鈣的峰面積基本不變，RSD%為0.32%。
3.8 方法耐用性考察
取3條不同品牌的色譜柱，分別測(cè)定，各系統(tǒng)適用性參數(shù)見(jiàn)表1。結(jié)果表明 ，本方法耐用性良好。表1 方法耐用性考察結(jié)果
3.9 含量測(cè)定方法
取本品20粒內(nèi)容物，精密稱(chēng)定，混合均勻，精密稱(chēng)取適量(約相當(dāng)于羥苯磺酸鈣250 mg)，置100 mL量瓶中，加水適量，振搖使溶解后加水稀釋至刻度，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液2 mL，置25 mL量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻。精密量取20 μL，注入色譜儀，記錄色譜圖;另取羥苯磺酸鈣對(duì)照品20 mg，精密稱(chēng)定，置100 mL量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，同法測(cè)定。按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，即得。
4 4種含量測(cè)定方法的比較
分別采用以上建立的UV吸收系數(shù)法、HPLC法和文獻(xiàn)報(bào)道的UV對(duì)照品法[1]及鈰量滴定法[2]對(duì)3批樣品進(jìn)行含量測(cè)定，測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表2。表2 4種含量測(cè)定方法的結(jié)果比較 標(biāo)示量
5 討 論
5.1 羥苯磺酸鈣的分子結(jié)構(gòu)中含有2個(gè)酚羥基，決定了其光不穩(wěn)定性和易氧化等化學(xué)性質(zhì)[4]。為此，本文建立了專(zhuān)屬性較高的高效液相色譜法，該方法可有效分離羥苯磺酸鈣在合成過(guò)程中引入的雜質(zhì)對(duì)苯二酚以及在儲(chǔ)存過(guò)程中產(chǎn)生的其他降解產(chǎn)物。
5.2 從表2的結(jié)果分析，鈰量滴定法、UV對(duì)照品法和UV吸收系數(shù)法3種方法的結(jié)果基本一致，而HPLC法的結(jié)果較前3種方法低約0.3%～1.7%，表明HPLC法對(duì)可能存在的降解產(chǎn)物有較好的專(zhuān)屬性和分離效果，較其他3種方法更能有效反映產(chǎn)品的真實(shí)質(zhì)量，有利于產(chǎn)品的質(zhì)量控制和政府監(jiān)管部門(mén)的稽查監(jiān)督工作。
5.3 國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)收載的鈰量滴定法，需要使用劇毒物質(zhì)三氧化二砷標(biāo)化滴定液，不利于實(shí)驗(yàn)室的管理和環(huán)境的保護(hù)，建議控制使用或盡量避免使用該方法。
5.4 5.5 從HPLC的專(zhuān)屬性考察，本品在水溶液中對(duì)光的敏感度比固體粉末更強(qiáng)，提示在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中除避免陽(yáng)光直射外，溶液配制后不宜放置太長(zhǎng)時(shí)間。
【參考文獻(xiàn)】
[1] 中國(guó)藥品生物制品檢定所.進(jìn)口藥品復(fù)核標(biāo)準(zhǔn)匯編[M].2002.
[2] BP:2008[S].2008：351.
[3] 國(guó)家藥典委員會(huì).國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)新藥轉(zhuǎn)正標(biāo)準(zhǔn):34冊(cè)[S].34-49.
[4] 王緋，陳英.羥苯磺酸鈣有關(guān)物質(zhì)方法的建立[J].廣東藥學(xué)院學(xué)報(bào)，2006，22(3)：279-280.
[5] 陳英.羥苯磺酸鈣吸收系數(shù)的測(cè)定和應(yīng)用[J].今日藥學(xué),2008,18(4)：32.
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