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雙水相萃取技術(shù)在生物制藥的應用
雙水相萃取技術(shù)在生物制藥的應用
摘要:雙水相萃取技術(shù)作為一項新的分離技術(shù)日益受到重視。
本文就雙水相萃取技術(shù)的特點進行了介紹,并對雙水相體系在生物制藥方面的應用進行了綜述,對雙水相體系的應用前景進行了展望。
關鍵詞:雙水相萃取技術(shù);生物制藥;分離純化;應用
1 前言
隨著基因工程、蛋白質(zhì)工程、細胞培養(yǎng)工程、代謝工程等高新技術(shù)研究工作的廣泛開展,各種高附加值的生化新產(chǎn)品不斷涌現(xiàn),對生化分離技術(shù)也提出了越來越高的要求。
雙水相萃取是1896年由Beijerinck最早發(fā)現(xiàn)的,1956年瑞典Lund大學的Albertsson 第一次用來提取生物物質(zhì),1979年德國的 Kula等人將雙水相萃取用于生物產(chǎn)品分離純化。
此后,雙水相體系的研究和應用逐步展開,并取得很大進展。
該技術(shù)由于操作方便,分離效率高,不會導致被分離物質(zhì)的破壞和失活,目前廣泛應用于生物大分子物質(zhì)的分離和純化,在生物小分子物質(zhì)的分離和生物無機化學等方面的應用研究也已經(jīng)展開,相信隨著該技術(shù)的進一步完善,其應用將更加廣泛。
2 雙水相萃取技術(shù)的簡介
雙水相萃取技術(shù)(Aqueous two-phase extraction,ATPE)是指把兩種聚合物或一種聚合物與一種鹽的水溶液混合在一起,由于聚合物與聚合物之間或聚合物與鹽之間的不相溶性形成兩相,是近年來引人注目,極有前途的新型分離技術(shù)。
被分離物質(zhì)進入雙水相體系后由于表面性質(zhì)、電荷間作用和各種作用力(疏水鍵、氫鍵和離子鍵)等因素的影響,在兩相間的分配系數(shù)不同,導致其在上下相的濃度不同達到分離目的。
常見的雙水相體系主要有五類:聚合物/聚合物/水;高分子電解質(zhì)/聚合物/水;高分子電解質(zhì)/高分子電解質(zhì)/水;聚合物/低分子量組分/水;聚合物/無機鹽。
目前應用最廣泛的的雙水相體系是聚乙二醇/無機鹽體系。
雙水相體系萃取分離技術(shù)具有其獨特的特點。
首先反應條件比較溫和,因此對被分離物質(zhì)不會起到破壞作用,特別適合對具有生物活性的物質(zhì)進行分離提純。
其次,雙水相萃取技術(shù)操作方便,設備簡單,并且能夠直接與后續(xù)提純工藝連接,不用進行特殊處理。
雙水相萃取技術(shù)的回收率也比較高,如果選擇的體系合適,能夠達到百分之八九十以上,并且分離速度也十分迅速。
3 雙水相萃取技術(shù)在生物制藥領域的應用
因為雙水相萃取技術(shù)的諸多優(yōu)勢,使其在生物制藥領域有非常廣泛的應用。
3.1 雙水相萃取技術(shù)在分離提純蛋白質(zhì)、酶中的應用
分離純化出高純度有生物活性的蛋白質(zhì)一直是一項非常艱巨的工作。
由于蛋白質(zhì)的市場價格非常昂貴,因此提高其回收率能夠帶來十分巨大的經(jīng)濟效益。
雙水相萃取法分離純化蛋白質(zhì)有很多優(yōu)勢。
首先,體系含水量高達百分之八十,萃取環(huán)境和操作條件十分溫和,因此不易造成蛋白質(zhì)的失活。
其次,雙水相體系的界面張力遠遠低于水/有機溶劑兩相體系的界面張力,有助于強化相際間的質(zhì)量傳遞;最后,雙水相萃取技術(shù)還有利于按比例放大和進行連續(xù)性操作。
3.2 從天然物中提取有效成分
制藥的重要資源就是天然產(chǎn)物。
但是許多有效成分的穩(wěn)定性都比較差,因此傳統(tǒng)的萃取方法既操作復雜,萃取率還低。
雙水相操作條件溫和,有利于保護活性成分,因此在天然產(chǎn)物中有效成分的提取中有著非常重要的地位。
最典型的是黃芩苷的提取。
黃芩苷是黃芩的主要有效成分,具有很好的抗氧化功能。
李偉等考查了黃芩苷在環(huán)氧乙烷環(huán)氧丙烷無規(guī)共聚物/混合磷酸鉀雙水相系統(tǒng)和溫度誘導相分離后的分配行為。
另外,通過調(diào)整雙水相體系相的組成、質(zhì)量分數(shù)以及影響分配平衡各種因素,該技術(shù)還可以應用于植物精油、黃酮、皂苷和酶等不同極性、不同類型的化學成分的提取和分離。
3.3 雙水相萃取技術(shù)在抗生素制備中的應用
雙水相萃取技術(shù)在抗生素領域基本涉及了各類抗生素,與傳統(tǒng)方法相比,顯示出了高效化和節(jié)能化的顯著優(yōu)勢。
潘杰等簡單闡明了雙水相萃取技術(shù)在抗生素分離中的應用情況,分析了影響雙水相系統(tǒng)分離抗生素的各種因素,提出了導致雙水相中抗生素非對稱分配的主要作用力為疏水作用力,同時對雙水相萃取技術(shù)應用在抗生素分離中的發(fā)展方向做了探討。
秦德華等用雙水相萃取技術(shù)萃取了丙酰螺旋霉素,分別用PRO-SPM溶液和發(fā)酵液,對聚乙二醇和磷酸鹽成相系統(tǒng)進行了研究,選出了合適的成相系統(tǒng)。
3.4 雙水相技術(shù)在手性藥物分離中的應用
手性藥物的獲得一般能夠通過手性源合成法、不對稱合成法和外消旋體拆分法。
現(xiàn)有的各種分離方法成本較高且繁瑣,探索新的方法具有十分重要的意義。
陳曉青等利用雙水相手性萃取技術(shù)拆分扁桃酸外消旋體;邢建敏利用雙水相體系為手性識別體系,研究了異丙醇/鹽和TritonX-114溫度雙水相體系中扁桃酸的分配行為,通過以L-酒石酸正戊酯和環(huán)糊精作為手性識別劑,優(yōu)選出了最佳的分離體系。
4 結(jié)束語
雙相萃取技術(shù)在藥物的分離提取應用上顯示出明顯的優(yōu)勢,是一種應用前景廣闊的新型生物分離技術(shù)。
但是實現(xiàn)其工業(yè)性應用還需要進行進一步的研究改進。
隨著科學技術(shù)的進一步發(fā)展,雙相萃取技術(shù)同其他技術(shù)相結(jié)合的提取分離新工藝將是提取分離行業(yè)的發(fā)展方向。
雙相萃取技術(shù)的日益成熟,必將使雙相萃取技術(shù)擁有更廣泛的應用范圍。
參考文獻
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